中药学论文_人参皂苷Rg1对大鼠坐骨神经冷冻保
文章摘要:目的：观察人参皂苷Rg1(G-Rg1)对冷冻保存大鼠坐骨神经施万细胞（SCs）生物学活性影响，探讨G-Rg1减轻冷冻保存大鼠坐骨神经SCs损伤的可行性。方法：取SD大鼠双侧坐骨神经，随机分为7组：新鲜组，空白组，G-Rg1组(1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4、1×10-3 mol·L-1 G-Rg1)，除新鲜组神经外，将其余各组神经依次置于含0、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4、1×10-3 mol·L-1 G-Rg1的冷冻保存液中液氮保存4周。原位末端标记法（TUNEL）/S100检测各组神经SCs凋亡，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胱天蛋白酶（Caspase）-9、Caspase-3和主要组织相容性复合体（MHC）-Ⅰ、MHC-Ⅱ表达。将新鲜组和液氮保存4周的6组神经，置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养7 d，Western blot检测胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）、神经生长因子（NGF）表达。用液氮保存4周的空白组和1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol·L-1 G-Rg1组坐骨神经，同种异体移植修复Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损(空白移植组，1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol·L-1 G-Rg1移植组)，同时设新鲜坐骨神经同种异体移植、同系移植对照组。移植术后16周，电生理检测肌肉复合动作电位（CMAP）和神经传导速度（NCV），神经丝（NF）-200免疫荧光单染、透射电镜和甲苯胺蓝染色分析再生神经组织学。结果：与新鲜组比较，空白组和G-Rg1各剂量组Caspase-9、Caspase-3表达、SCs凋亡明显升高（P<0.05），GDNF、NGF表达及MHC-1、MHC-Ⅱ表达明显降低（P<0.05）。与空白组比较，1×10-7～1×10-4 mol·L-1 G-Rg1组Caspase-9、Caspase-3表达显著降低（P<0.01）；1×10-7～1×10-4 mol·L-1 G-Rg1组SCs凋亡降低，1×10-3 mol·L-1组升高（P<0.05）；1×10-7～1×10-4mol·L-1 G-Rg1组GDNF、NGF表达升高，1×10-3mol·L-1组降低（P<0.05）；G-Rg1各剂量组MHC-1、MHC-Ⅱ表达差异无统计学意义。与1×10-7、1×10-3 mol·L-1 G-Rg1组比较，1×10-6～1×10-4 mol·L-1组Caspase-3表达、SCs凋亡降低（P<0.05），GDNF、NGF表达升高（P<0.01，P<0.01），MHC-1、MHC-Ⅱ表达差异无统计学意义。移植术后16周，与同系移植组比较，空白移植组和G-Rg1移植组各组CMAP、NCV、髓鞘厚度、有髓神经纤维数降低（P<0.01），1×10-6、1×10-4 mol·L-1 G-Rg1移植组NF200降低（P<0.01）；与同异移植组比较，空白移植组和G-Rg1移植各组CMAP、NCV、NF200、髓鞘厚度、有髓神经纤维数升高（P<0.05）；与空白移植组相比，G-Rg1移植各组CMAP、NCV、NF200、髓鞘厚度、有髓神经纤维数升高（P<0.05）；G-Rg1移植各组间，1×10-5 mol·L-1移植组各项指标优于1×10-4、1×10-6 mol·L-1移植组（P<0.05）。结论：一定浓度的G-Rg1能维持冷冻保存的大鼠坐骨神经SCs生物活性，减轻神经冷冻保存损伤，异体移植后能促进受者神经再生。
文章关键词:
论文DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.20221039
论文分类号:R285.5
